Иммуноферментный анализ крови расшифровка

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).

Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом.
стицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.


Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.


ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Преимущества метода

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.


Недостатки метода

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания к назначению и выявляемые заболевания

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

  1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
    • IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
    • IgG к ВИЧ;
    • Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
    • Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
    • Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
    • Ig M и IgG к токсоплазмозу;
    • Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
    • IgG к паразитарным заболеваниям;
    • Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
    • IgG к хеликобактерной инфекции.

  2. Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
  3. Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
  4. Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Анализируемый биоматериал и особенности его забора

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

Сроки готовности результатов ИФА

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

Расшифровка иммуноферментного анализа

Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Анализируемые показатели


  • IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
  • IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
  • IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
  • IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

Возможные результаты ИФА

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.


Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

www.kp.ru

Особенности проведения ИФА анализа крови

Анализ крови методом ИФА позволяет определять антитела или антигены в пробе крови пациента. Это исследование применяется для определения содержания иммуноглобулинов, гормонов, а также иммунологических комплексов.

ИФА анализ крови назначают пациентам в следующих случаях:

  • с целью диагностики инфекций, передающихся половым путем (микоплазмы, уреаплазмы, хламидиоза, сифилиса, трихомонады);
  • для определения вирусных заболеваний (герпеса, цитомегаловируса, гепатита, вируса Эпштейна-Барра);
  • для выявления уровня гормонов;
  • для диагностики онкологических заболеваний;
  • с целью определения иммунодефицита;
  • для диагностирования аллергий;
  • перед некоторыми операциями в качестве комплексного обследования;
  • для оценки эффективности лечения.

Действие ИФА основано на определении иммуноглобулинов (специфических белков-антител) в сыворотке крови. Данные вещества вырабатывает иммунная система человека в случае проникновения в организм чужеродных микроорганизмов — антигенов. Эти иммунные молекулы способны связываться с множеством патогенов в организме и нейтрализовать их. Благодаря такому свойству, как специфичность, иммуноглобулины связываются с определенным антигеном и образуют так называемый комплекс антиген-антитело. Этот комплекс исследуют по качественным и количественным характеристикам во время проведения данного теста.

Специалисты выделяю пять классов иммуноглобулинов. Но чаще всего во время исследований определяют только три класса – A, M и G. Эти антитела имеют свойство накапливаться в человеческом организме в разный период от момента заражения.

Иммуноглобулины класса М (IgM) можно наблюдать в крови человека уже на 5 сутки от момента инфицирования. Они присутствуют в организме около 5–6 недель, после чего исчезают из кровотока. Они указывают на острое течение заболевания либо его обострение в случае хронического течения.

Иммуноглобулины класса G (IgG) появляются в крови человека через 3–4 недели с момента заражения. Они способны существовать в ней на протяжении нескольких месяцев или даже лет. По расшифровке ИФА анализа крови увеличение количества данных веществ говорит о текущей инфекции либо же реинфекции — повторном инфицировании.


Говоря об иммуноглобулинах класса А (IgA), их можно наблюдать в крови пациента спустя 2–4 недели после заражения или обострения инфекционного заболевания. Они исчезают из кровотока спустя 2–8 недель после уничтожения инфекционных агентов, и таким образом подтверждают излечение от инфекции.

В том случае, если после окончания заболевания в расшифровке ИФА анализа крови определяется присутствие антител IgA, это говорит о том, что болезнь перешла в хроническую форму.

В основном для проведения анализа крови методом ИФА материалом выступает венозная кровь пациента. Но также исследовать можно спинномозговую жидкость, содержимое стекловидного тела, а также околоплодные воды.

Сдавать кровь следует натощак (пациенту необходимо соблюсти 12-ти часовой интервал между анализом и последним приемом пищи). Если человек принимает лекарства, он должен сообщить об этом специалисту, так как некоторые медикаменты способны искажать результаты анализа. Также на достоверность показателей исследования оказывает влияние прием алкоголя и наркотиков.

В бланке результата этого исследования указывают позитивный (+) либо негативный (-) результат наличия каждого класса иммуноглобулинов. Предлагаем рассмотреть расшифровку ИФА анализа крови.

  1. Негативный результат IgM, IgG, IgA говорит об отсутствии иммунитета к инфекции.

  2. Негативный результат IgA, IgM и позитивный IgG свидетельствуют о постинфекционном или поствакцинальном иммунитете.
  3. Негативный или позитивный результат IgG, IgA и позитивный результат IgM указывают на острую инфекцию.
  4. Позитивный результат IgG, IgM, IgA является показателем обострения хронической инфекционной болезни.
  5. Негативный результат IgM и негативный либо положительный результат IgA, IgG указывают на хроническую инфекцию.
  6. Негативный результат IgM и отсутствие IgA, IgG являются подтверждением выздоровления пациента.

Анализ крови методом ИФА характеризуется рядом преимуществ:

  • высокой точностью;
  • возможностью проведения ранней диагностики инфекционного процесса;
  • высоким уровнем унификации;
  • коротким периодом времени, необходимым для получения результата;
  • удобством в работе;
  • автоматизацией всех этапов исследования;
  • относительно небольшой стоимостью.

Недостатком данного метода может выступать его свойство иногда давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Помимо технических ошибок при проведении ИФА среди причин ложных результатов выделяют ревматоидный фактор у человека, наличие у него хронических заболеваний, применение лекарств, а также нарушения обмена веществ.

ИФА анализ крови на паразитов

ИФА анализ крови на паразитов Очень часто врачи назначают ИФА анализ крови на паразитов. Он позволяет выявить наличие в организме многих паразитарных процессов, в частности:

  • аскаридоза;
  • трихинеллеза;
  • цистицеркоза;
  • тениоза;
  • фасциолеза;
  • описторхоза;
  • лямблиоза;
  • висцерального и кожного лейшманиоза;
  • амебиаза;
  • токсоплазмоза.

Специфичность этого метода при определении паразитов равна примерно 90%. Благодаря ему можно определить вид паразитов, их количество, а также проследить динамику развития данных процессов.

www.wjtoday.ru

Подробнее об иммуноферментном анализе крови

Анализ биологического материала иммуноферментного типа производится в течение относительно быстрого времени.

Основная задача лаборантов, проводящих исследование крови пациента, – определение наличия и количества антител или антигенов в пробе материала.

Фото:

Антитела в крови

Для чего назначают этот анализ? Существует несколько ситуаций, в которых исследование помогает врачам прояснить клиническую картину состояния пациента.

Подробнее о целях назначения:

  • диагностика различных венерических заболеваний (в том числе и микоплазмоз, уреаплазмоз, сифилис, хламидиоз и т. д.);
  • подтверждение наличия вирусных заболеваний (в т. ч. герпес, гепатиты, цитамегаловирусы и т. д.);
  • определение уровня гормонального дисбаланса (в т. ч. и количества ТТГ);
  • диагностика состояния организма, истощенного онкологическими процессами;
  • подтверждение иммунодефицита;
  • исследование процессов аллергических реакций;
  • комплексное обследование организма перед оперативными вмешательствами;
  • оценка качества получаемого пациентом лечения.

Как проходит исследование иммуноферментного вида? Лаборант, получающий материал на анализ, с помощью специального оборудования выясняет количество специфических белков-антител в его объеме.

Если это количество соответствует норме, то врач делает соответствующую пометку в листке анализов.

Если объем иммуноглобулинов отличается от нормы в большую или в меньшую сторону, проба крови, полученная у пациента, проходит дополнительное исследование, позволяющее выявить причину образования антигенов – чужеродных для человеческого организма веществ.

Фото:

Лабораторные исследования крови

Анализ крови иммуноферментного типа позволяет отследить нормативное содержание гомонов, в том числе и ТТГ. Тиреотропный гормон (ТТГ) вырабатывается гипофизом человека.

Его основная задача – регуляция функционирования щитовидной железы (Т3 и Т4).

В том случае, если снижение этих гормонов ведет к появлению патологической ситуации, гипофиз активизирует выработку ТТГ, который и запускает процессы синтезирования Т3 и Т4.

Методы расшифровки результатов

Расшифровка данных, полученных в ходе анализирования сыворотки крови, производится параллельно исследованию.

Бланк, который пациент получает на руки после процедуры ИФА, содержит в себе непонятные столбцы буквенных обозначений.

Их расшифровка человеком, несведущим в медицине, может быть затруднена. Если вы хотите знать, как проходит расшифровка буквенных обозначений, то ознакомьтесь с этим пунктом статьи.

Попадая в связку с иммуноглобулином, антигены образуют связку антиген–антитело. Этот комплекс и исследуется врачами, работающими в лабораториях.

На данный момент существует пять типов иммуноглобулинов, самыми распространенными из которых являются типы A, G, M.

Иммуноглобулины, соответствующие типу M, обнаруживаются в пробе крови, взятой у человека, на пятые-шестые сутки с момента его инфицирования.

Обнаружение иммуноглобулина такого типа может свидетельствовать об остром заболевании, поразившем организм человека.
Виды антител к инфекциям

Иммуноглобулины, соответствующие классу G, – маркер, встречающийся в пробе крови с третьей или четвертой недели, начиная с момента инфицирования.

Они указывают на наличие в организме пациента хронической инфекции или реинфекции, которая может наступить при отсутствии эффективного лечения (повторное инфицирование организма уже содержащимися в нем патогенными клетками).

Иммуноглобулины, соответствующие типу А, обнаруживаются в пробе крови пациента через две – четыре недели с момента инфицирования. Они сигнализируют о наличии затянувшейся инфекции.

Их отсутствие при повторных лабораторных анализах, проведенных через время, может указывать на эффективность лечения и полное исчезновение заболевания, от которого страдал человек.

Расшифровка результатов иммуноферментного анализа крови в виде таблицы:

A G M Итог
Негативный Негативный Негативный Отсутствие иммунитета к инфекции.
Негативный Позитивный Негативный Постинфекционный/ поствакцинальный иммунитет
Негативный / позитивный Негативный / позитивный Позитивный Острая инфекция / хроническая инфекция
Позитивный Позитивный Позитивный Обострение хронической инфекции
Отсутствие Отсутствие Негативный Выздоровление

Проведение анализа с целью обнаружения паразитов

Врачи, подозревающие наличие паразитов в организмах пациентов, обязаны направить больных на иммуноферментную диагностику.

Исследования сыворотки крови больного человека на паразитов позволит выявить в ней наличие следующих патологических включений:

  • лямблиоза;
  • аскаридоза;
  • цистицеркоза;
  • трихинеллеза;
  • описторхоза;
  • токсоплазмоза;
  • фасциолеза;
  • лейшманиоза (кожного или висцерального типа).

Этот анализ с большой точностью позволяет определить наличие, а главное, разновидность паразитов, атаковавших пациентов. Расшифровка этого анализа достаточно информативна.

Врач–паразитолог, получивший ее из лаборатории, сможет немедленно назначить лечение, которое в скором времени избавит больного человека от наличия в нем паразитов.

Чтобы сдать кровь на иммуноферментную диагностику, подразумевающую определение общих или сложных инфекций, наличие паразитов или гормонального дисбаланса (ТТГ), следует не есть в день сбора биологического материала.

Врачи, ратующие за увеличение точности данных, просят пациентов не принимать пищу в течение двенадцати часов перед сдачей сыворотки крови.

Видео:

Этот анализ нельзя сдавать людям, принимавшим алкоголь и наркотики в недавнем прошлом – его результаты будут неточными.

Биологический материал человека, на котором базируется иммуноферментное исследование – сыворотка крови, взятая из вены.

В некоторых случаях (в основном, для уточнения информации в особо тяжелых случаях), кроме сыворотки, врачи берут на иммуноферментный анализ спинномозговую жидкость, околоплодные воды (у беременных женщин) и содержимое стекловидного тела.

Таким образом, анализ сыворотки крови иммуноферментного типа позволяет выявить не только хронические или острые инфекционные заболевания, протекающие в теле человека, или дисбаланс ТТГ, провоцируемый сбоем работы гипофиза, но и наличие паразитов, атакующих внутренние органы.

Видео:

Среднее время, в течение которого проводится исследование сыворотки крови, забранной в лабораторию, – одни сутки.

Сдать анализ можно в любой клинике – как в частной, так и в муниципальной. Получить направление на сдачу анализа можно у врачей-иммунологов, эндокринологов, паразитологов и терапевтов.

moydiagnos.ru

Методы иммуноферментного исследования

Когда в организм человека попадают чужеродные агенты (антигены) система иммунитета сразу принимается вырабатывать специфические белки (антитела), необходимые для уничтожения чужеродных агентов. Для каждого возбудителя болезни есть свой набор таких белков. Они селективно связываются с антигенами, вследствие чего образуется комплекс антиген-антитело. Например, необходимо выявить определенный вирус в крови. Для этого в нее добавляют определенные антитела.

В медицине в основном применяется три вида ИФА:

  • прямой;
  • непрямой;
  • «сэндвич»-типа.

Прямой метод заключается в следующем: к сорбированному антигену добавляют помеченные антитела.

Непрямой метод состоит из двух стадий:

  1. Антиген сорбируется на полистирольном планшете, затем к нему добавляют специфические антитела.
  2. Анализ получившихся в результате реакции комплексов антиген-антитело с помощью антивидовых белков.

Метод «сэндвич»-типа похож на непрямой, но в ходе этого метода на планшете сорбируются не антигены, а антитела. Этот метод может быть использован только для выявления тех антигенов, у которых существует минимумом две антигенные детерминанты. «Сэндвич»-методом возможно диагностировать различные инфекции:

  • вирусные гепатиты;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус;
  • инфекции герпеса;
  • токсоплазмоз и т. д.

Расшифровка результатов иммуноферментного исследования

При проведении ИФА можно выявить различные виды антител. Это иммуноглобулины класса A, M, G. Они присутствуют в организме человека в разное время, прошедшее после заражения. Своевременно расшифруйте ифа.

На 5 день после инфицирования проявляются иммуноглобулины класса М. Они находятся в организме от 5 до 6 недель. Они указывают на острое протекание болезни либо на обострение хронической формы заболевания.

иммуноферментное исследование кровиЧерез три-четыре недели после заражения в организме обнаруживаются иммуноглобулины класса G, если расшифровка ИФА показывает, что увеличение количества этих веществ говорит или о протекающей инфекции, или о повторном инфицировании.

Через 2-4 недели после попадания в организм инфекции или обострения хронической формы в организме обнаруживаются иммуноглобулины класса А. Спустя 2-8 недель после уничтожения антигенов эти вещества исчезают, что говорит об избавлении от инфекции. Проводится расшифровка лабораторного исследования.

После исследования выдают бланк, где указывается положительный либо отрицательный результат присутствия иммуноглобулинов классов A, M, G.

Расшифровка ифа означает следующее определение:

  1. Отрицательный результат lgA, lgG, lgM говорит об отсутствии иммунитета.
  2. На инфекцию острого характера указывают положительный или отрицательный lgG, lgA и положительный lgM.
  3. Показателем хронической инфекционной болезни является положительный результат lgG, lgM, lgA.
  4. На хроническую инфекцию указывает положительный lgM, отрицательный lgG, lgA.
  5. Показателем выздоровления является отрицательный результат lgM и отсутствие lgA, lgG.

Анализ крови ифа обладает положительными свойствами, которые указывают на его уникальность:

  • ранняя диагностика болезни;
  • высокая точность;
  • расшифровка осуществляется в короткие сроки;
  • все этапы автоматизированы;
  • невысокая стоимость.

Минусом ифа является то, что в некоторых случаях могут получиться как ложноотрицательные, так и ложноположительные результаты.

101analiz.ru

Суть и показания

ИФА – метод исследования иммунной реакции, которую проявляют антигены в отношении антител. К антителам в этом случае присоединяют ферментную метку, меняющую цвет образца, который исследуется благодаря действию реагентов.

Это исследование позволяет определить показатели реакций комплекса антитело-антиген и установить изменение ферментов, их возникновение ,а также изменение уровня их активности.

Антигенами называют все чужеродные вещества в крови, которые вызывают защитную реакцию, то есть процессы, во время которых вырабатываются специфические белки, то есть иммуноглобулины.

Так как у каждого из возбудителей набор антигенов уникальный, реакция на них тоже будет специфической.

Такой метод, как иммуноферментный анализ крови позволяет найти все количественные и качественные изменения антигенов.

Для проведения ИФА забор крови осуществляется из вены. Кроме крови могут понадобиться пробы из стекловидного тела или околоплодных вод.

Метод ИФА показан в следующих ситуациях:

  • При диагностике онкологических болезней;
  • Для определения в крови таких инфекций, как сифилис, уреоплазма, трихомонада, хламидиоз, микоплазма и прочих ЗППП;
  • Для диагностики таких вирусов, как герпес и гепатит, вирус Эпштейна-Барра, цитомегаловируса;
  • При определении иммунодефицита;
  • При диагностировании аллергии;
  • Для определения уровня гормонов;
  • Перед операциями по пересадки органов;
  • Во время лечения для определения, насколько эффективнее выбранный метод.

Также этот метод анализа можно использовать для выявления в организме паразитов и заболеваний, ими вызванных: трихинеллез, токсоплазмоз, аскаридоз, лейшманиоз(кожный и висцеральный), цистицеркоз, амебиаз, лямблии, фасциолез, тениоз, цистицеркоз, описторхоз.

Этот метод позволит выявить и количество паразитов, и их вид и длительность обитания в организме.

Метод имеет определенные плюсы: точность, возможность провести раннюю диагностику и проследить за динамикой, возможность получить результаты быстро.

Анализ крови ифа

Расшифровка

Антитела, они же иммуноглобулины, делятся на пять классов, но обычно определяются только три из них: М,G и А, которые в организме накапливаются в разные периоды после инфицирования.

Самыми первыми появляются иммуноглобулины М, они же IgM. Возникают они с через 4-5 суток после заражения и в крови находятся полтора месяца, после чего исчезают. Если анализ ИФА показывает их присутствие, мы имеем дело с острым периодом болезни или её обострением.

Недели через три-четыре возникают IgG, то есть иммуноглобулины класса G. Они могут присутствовать у нас несколько месяцев и даже лет подряд. Если анализ ИФА проведен был два раза с промежутком в две недели, а количество IgG в обеих пробах был увеличен, речь может идти об инфекции или повторном заражении ею.

IgA, то есть антитела класса А выявляются уже после обострения инфекции или через месяц после её появления в организме. Большинство из них циркулируют в наших слизистых оболочках и только одна пятая часть – в крови. Пропадают они только после того, как все инфекционные агенты уничтожены, то есть минимум через две недели после заражения, максимум – через восемь.

Если после излечения анализ ИФА показывает их наличие, недуг перешел в хроническую стадию.

Когда расшифровка проводится, нужно обратить внимание еще и на знаки + и – в бланке.

Полноценный вердикт может вынести только врач, но о некоторых особенностях организма можно судить исходя из следующих данных:

  • Об отсутствии иммунитета к инфекциям свидетельствуют такое сочетание показателей, как JgM , JgG, JgA с минусом везде;
  • О наличии иммунитета после вакцины или инфекции свидетельствуют JgM и JgA со знаком минус и JgG со знаком плюс (JgG (+));
  • Про наличие острой инфекции могут рассказать следующие показатели: JgA (-/+),JgG (-/+) и JgM (+);
  • При обострении хронических инфекций в бланке будут следующие обозначения: JgM, JgG и JgA с плюсами везде;
  • При хронических инфекциях наблюдается следующая картина: JgG (+/-),JgM (-), и JgA (+/-);
  • О выздоровлении свидетельствует пометка JgM (-).

Также нередко проводится такое исследование, как иммуноферментный анализ кровяной сыворотки. Он нужен для исследования гормонов щитовидной железы. Важны здесь показатели таких гормонов, как тироксин, свободный тироксин, трийодтиронин, свободный трийодтиронин и тиреоглобулин.

Кроме того, такое исследование пригодится для диагностики инфекционных и аутоиммунных болезней.

parazitovnetu.ru

Показания к назначению анализа крови методом ИФА и принцип его действия

Как мы уже отметили, анализ крови методом ИФА — это лабораторное исследование, посредством которого определяются антигены или антитела в пробе крови. Данный анализ применяется для выявления уровня гормонов, иммунологических комплексов и иммуноглобулинов. Существуют следующие показания для сдачи ИФА анализа:

  • Диагностирование аллергий.
  • Диагностирование болезней вирусного происхождения – Эпштейн-Барр вирус, герпес, гепатиты, цитомегаловирус.
  • Диагностика инфекций, передающихся половым путем – микоплазма, уреаплазма, сифилис, трихомонада, хламидиоз.
  • Определение иммунодефицита.
  • Диагностика онкологических патологий.
  • Оценка эффективности терапии.
  • Определение уровня гормонов.
  • Предоперационное комплексное обследование.

Принцип действия иммуноферментного анализа крови основан на исследовании крови на наличие иммуноглобулинов (специфических белков-антител). Иммуноглобулины вырабатываются иммунитетом при попадании в организм человека антигенов (чужеродных микроорганизмов). Эти иммунные молекулы связываются с различными инфекционными возбудителями и нейтрализуют их. Важной отличительной чертой, которой обладают иммуноглобулины, является их специфичность. Благодаря таким характеристикам они могут образовывать комплекс антиген-антитело, связываясь с определенным антигеном. Во время выполнения анализа крови ИФА именно этот комплекс определяют количественно и качественно.

Для проведения данного исследования зачастую используют кровь человека. Однако в качестве материала для анализа можно брать содержимое стекловидного тела, околоплодные воды, спинномозговую жидкость. Проба крови, как правило, берется из локтевой вены пациента. Кровь рекомендуется сдавать натощак (должно пройти не менее 12 часов со времени последнего приема пищи). Если пациент принимает лекарственные средства необходимо сообщить врачу, поскольку некоторые из них могут повлиять на результат анализа. Также на достоверность результатов анализов влияет прием наркотиков и алкоголя.

Расшифровка анализа крови на ИФА

В бланке данного анализа обычно указывается отрицательный (-) или положительный (+) результат вычисления каждого класса иммуноглобулинов.

Предлагаем рассмотреть интерпретацию вероятной расшифровки анализа крови на ИФА.

  • IgG, IgA не определяются и результат IgM отрицательный – полное выздоровление.
  • Результат IgM, IgA, IgG отрицательный – иммунитет к инфекции отсутствует.
  • Результат IgG, IgA положительный и отрицательный, а также результат IgM положительный – наличие острой инфекции.
  • Положительный результат IgG и отрицательный результат IgA и IgM –поствакцинальный или постинфекционный иммунитет.
  • Положительный или отрицательный результат IgG, IgA и отрицательный результат IgM – хроническая инфекция.
  • Результат IgG, IgM, IgA положительный – обострение хронической инфекционной патологии.

В иммуноферментном анализе крови кроме уточнения классов антител в расшифровке указываются количественные их показатели. Однако обширное их объяснение предоставляет только лечащий доктор.

Достоинства и недостатки данного исследования

Сдать анализ ИФА врачи рекомендуют своим пациентам во многих случаях, поскольку это исследование имеет массу достоинств. Выделим основные из них:

  • Относительно небольшая стоимость.
  • Удобство в работе.
  • Возможность проведения диагностики на ранней стадии предполагаемого заболевания.
  • Относительно высокая точность полученных данных.
  • Небольшой промежуток времени, требуемый для получения результата исследования.
  • Возможность отслеживания динамики развития инфекционного процесса в организме.
  • Высокий уровень унификации, благодаря чему возможно проведение массовых обследований.
  • Автоматизация всех этапов исследования.

Недостатком ИФА анализа крови является то, что он может в достаточно редких случаях давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Также при проведении исследования помимо технических ошибок, причиной ложных результатов у пациента может послужить ревматоидный фактор, наличие у него хронических заболеваний (при которых вырабатываются антитела), прием некоторых лекарственных медицинских препаратов, нарушения обмена веществ.

Что помогает выявить анализ крови ИФА на паразитов?

Анализ крови методом ИФАДостаточно часто врачи назначают больным ИФА анализ крови на паразитов. Посредством данного способа исследования крови устанавливается присутствие в организме человека следующих паразитарных процессов:

  • Лямблиоз.
  • Аскаридоз.
  • Цистицеркоз.
  • Амебиаз.
  • Трихинеллез – исследование проводят не один раз, на 4–12 неделе после инфицирования определяется максимальный уровень антител.
  • Тениоз.
  • Описторхоз – выполняют дифференциальную диагностику между острой и хронической формой болезни.
  • Токсоплазмоз.
  • Фасциолез – в острой стадии болезни определяется наличие антител.
  • Кожный или висцеральный лейшманиоз.

Итак, можно подытожить: сдать анализ ИФА на паразитов необходимо для выявления антигенов (продуктов жизнедеятельности паразитов и само их наличие), а также антител (иммуноглобулинов). Специфичность данного метода исследования при определении паразитов согласно статистическим данным составляет около 90%. Благодаря этому анализу врач может в точности установить вид паразитов, их общее количество, а также проследить динамику развития патологических процессов благодаря уровню антител.

dolgojit.net

Реакция организма на патогенную флору

Для того чтобы понять, как, благодаря иммуноферментному анализу, лаборанты диагностируют различные заболевания, необходимо разобраться в физиологическом процессе, который происходит в организме во время заражения инфекциями. Когда патогенный микроорганизм попадает в кровоток, иммунная система человека демонстрирует защитную реакцию в виде выделения определенных веществ – антител. Они связываются с клеткой и анализируют, является ли она частью организма или внедрилась извне. Если иммунная система определила, что клетка чужеродная, то количество антител начинает увеличиваться с целью борьбы с патогенным микроорганизмом.

Антитела бывают разных видов, имеют свои особенности. Одни вещества появляются непосредственно в период инфицирования, другие остаются в течение всей жизни в организме человека и именно благодаря им вырабатывается стойкий иммунитет к конкретному заболеванию. Рзделяют белковые структуры на такие виды: A, D, E, M, G. В медицине антитела называют иммуноглобулинами. Поэтому принято обозначать показатели этих веществ латинскими буквами Ig.

Иммуноферментный анализ (ИФА) основан именно на данных медицинских знаний. С помощью специальных антигенов в лабораторных условиях можно определить наличие или отсутствие тех или иных антител в биологическом материале. По результатам такого анализа врач может поставить диагноз, а также определить не только наличие патологии, но и давность ее происхождения, выявить уровень опасности для пациента. При иммуноферментном анализе чаще других исследуют наличие антител групп M и G.

Что представляет собой ИФА?

На самом деле иммуноферментный анализ не является инновацией современного общества. Его изобрели еще в 80-х годах. Но для проведения таких исследований требовалась громоздкая дорогостоящая аппаратура. Поэтому использовали такой метод только в специально оснащенных научных лабораториях: его применяли для типирования клеток и тканей. А вот широкого распространения в диагностической медицине он тогда не получил, использовать его было технически сложно и крайне затратно. Лишь с развитием техники и изобретением биополимерных материалов ИФА усовершенствовали. После чего метод стал популяризироваться и завоевывать доверие в медицинских кругах.

Как уже было сказано выше, данный метод подразумевает обнаружение в биоматериале — крови, околоплодных водах, стекловидном теле или спинномозговой жидкости — определенных групп иммуноглобулинов.

Различают исследования без нанесения антигена на поверхность и твердофазный иммуноферментный анализ, который предполагает проведение реакции в специальных лунках. Последний метод имеет большую чувствительность и надежность, поэтому именно таким образом проводят анализ в медицинских лабораториях для обнаружения заболеваний человека.

Фазы иммуноферментного анализа

В зависимости от предполагаемого заболевания, из набора для иммуноферментного анализа используют необходимый антиген, который во время химической реакции при наличии инфекции свяжется с патогенной флорой. Этот процесс называется проведением иммунной реакции.

Затем для того, чтобы визуально определить результат исследования, проводят ферментативную фазу ИФА. Она предполагает окрашивание материала с помощью специальных реагентов. В данном исследовании применяют такие ферменты, как щелочная фосфатаза, пероксидаза и авидин. В зависимости от получившегося цвета в процессе проведения химических реакций и определяют результат иммуноферментного анализа.

Что такое колориметрия?

Анализ ферментативной фазы диагностики проводится с помощью метода, который имеет название «колориметрия». Дело в том, что не только цвет материала дает информацию об инфекции, но и получившаяся в результате химических реакций плотность окраса. Именно этот показатель определяет концентрацию патогенного микроорганизма. Если по старинке используют ручной метод диагностики, то для определения указанных показателей выстраивают специальный калибровочный график.

В современных лабораториях сегодня редко применяют ручной метод. Для проведения анализа ИФА используют специальный аппарат – колориметр, в котором вручную задаются лишь параметры исследования, а затем всю работу, включая построение графика, прибор проводит автоматически.

Методы ИФА

Различают прямой и непрямой методы иммуноферментного анализа. Первый вид занимает меньше времени, так как имеет лишь 3 стадии выполнения. Сперва к антигенам исследуемого материала, помещенным в специальные лунки, добавляют специфические антитела. Затем удаляют избыточное их количество и проводят ферментативную фазу анализа, получая таким образом результат.

Непрямой метод применяется намного чаще, так как имеет более высокую чувствительность по сравнению с прямым способом диагностики. При его проведении используется двойное исследование. А именно — сначала антиген связывают с немеченым антителом, а затем с меченым. Такой процесс занимает больше времени, но и результат является наиболее точным.

Наборы реагентов

Наборы для иммуноферментного анализа выпускают разные производители, в самых разных комплектациях. В России признанной является компания «Союз медико-биологический». Данный производитель выпускает наборы реагентов для исследования методом ИФА практически всех распространенных в наших широтах инфекций, поддающихся анализу таким способом. Кроме непосредственно самих реагентов в комплекты входят дополнительные материалы, что обеспечивает безопасность, удобство и быстроту выполнения анализа. Кроме того, химические субстанции окрашены в разные цвета, что снижает вероятность ошибки в выборе реагента лаборантом.

Отличаются химико-биологические наборы относительной доступностью, что прямо влияет на распространение и доступность иммуноферментного анализа для населения.

Преимущества метода диагностики

Несомненно, иммуноферментный анализ имеет ряд преимуществ по сравнению с другими диагностическими методиками:

  1. С его помощью можно определить даже незначительное наличие патогенных организмов, что говорит о высокой чувствительности теста.
  2. Возможность обнаружения заболевания на самых ранних стадиях, что значительно повышает шанс на благополучное излечение.
  3. Простота и удобство взятия биологического материала. Такой анализ проводят как в частных лабораториях, так и в государственных. При необходимости материал может взять медсестра у пациента дома.
  4. Для анализа требуется совсем незначительный объем биоматериала.
  5. Быстрое получение результата. Современное медицинское оборудование позволяет выполнить анализ в течение суток.
  6. Возможность обнаружения скрытых бессимптомных форм инфекции.
  7. Доступность исследования.
  8. При необходимости возможно проведение массовых обследований данным методом.
  9. Существует возможность отслеживания протекания заболевания и эффективности назначенного лечения, так как можно проводить анализ методом ИФА многократно абсолютно безопасно для пациента.
  10. Автоматизация этапов проведения анализа, что исключает человеческий фактор и повышает достоверность результатов.
  11. Реагенты для проведения ИФА хранятся достаточно долго – около года.
  12. Проведение анализа возможно при колебаниях температуры окружающей среды.

Иммуноглобулины группы M

Антитела группы М вырабатываются иммунной системой сразу после обнаружения чужеродного антигена. Следовательно, если иммуноферментный анализ завершился обнаружением таких веществ в биоматериале, то это свидетельствует об острой стадии протекания заболевания, первичном инфицировании. Иммуноглобулины группы М могут находиться в организме до месяца в зависимости от вида заражения. Затем их количество уменьшается до полного исчезновения.

Иммуноглобулины группы G

На смену иммуноглобулинам группы М появляются белковые структуры вида G. Эти вещества вырабатывают стойкий, в большинстве случаев пожизненный иммунитет к заболеванию. Определение белковой структуры IgG в исследуемом материале указывает на то, что организм ранее встречался с возбудителем и имеет защитную реакцию от повторного заражения.

Показания к диагностике

Иммуноферментный анализ крови применяют для определения разных инфекционных заболеваний, гормональных состояний, делают аллергопробы. А именно:

  • определяют уровень гормонов щитовидной железы;
  • показатели репродуктивной гормональной панели;
  • онкомаркеры;
  • обнаруживают возбудителей инфекционных заболеваний, таких как цитомегаловирус, гепатит, токсоплазма, краснуха, корь, туберкулез, хламидия, сифилис, микоплазма, уреплазма, кандида, лямблии и даже ВИЧ;
  • диагностируют аутоиммунные заболевания. В том числе часто используют для исследования гормонов щитовидной железы иммуноферментный анализ: ТТГ, ТГ, Т3 и Т4.

Кроме диагностических целей, метод иммуноферментного анализа применяют в научно-исследовательской медицинской деятельности.

Как проводится забор материала?

В большинстве случаев для анализа рекомендуется забор венозной крови. После обработки и подготовки материала для исследования проводят иммуноферментный анализ сыворотки крови или плазмы.

Особого внимания требует исследование гормональной панели, так как в данном случае крайне важно учитывать особенности забора материала. Например, диагностика большинства гормонов репродуктивной системы женщины требует взятия венозной крови в определенные дни менструального цикла. На ряд других гормонов действуют внешние факторы: сезонность, время суток, психологическое состояние пациента и многое другое. Не учитывая специфические факторы, можно получить ложный результат, что приведет к обострению заболевания или неправильно назначенному лечению.

В некоторых, чаще осложненных случаях, для анализа могут понадобиться спинномозговая жидкость, стекловидное тело или околоплодные воды беременной женщины. Процедуры по забору этих биологических материалов несут определенный риск, имеют противопоказания и восстановительный период. Поэтому следует проводить только по показаниям врача и под его профессиональным наблюдением такой иммуноферментный анализ. Расшифровка в таком случае требует специальных медицинских знаний и может занять некоторое время.

Подготовка к анализу

Иммуноферментный анализ следует проводить, придерживаясь всех рекомендаций, так как на результаты исследования влияют внешние факторы. Например, важно сдавать венозную кровь натощак утром (до 11 часов). За 2 недели до предполагаемого забора материала нужно прекратить прием каких-либо лекарственных препаратов, особенно гормональных. Несколько дней перед исследованием следует воздержаться от употребления алкоголя и жирной пищи, а также исключить физическую нагрузку, переживания и стрессы.

Расшифровка результатов

Расшифровка результатов иммуноферментного анализа требует специальных знаний об особенностях белковых структур (антител), о которых было рассказано выше (IgG и IgM). В соответствии с этими данными анализируют показатели исследований. В таблице описаны варианты, которые могут быть получены при проведении анализа:

Иммуноферментный анализ крови: расшифровка
Иммуноглобулины M Иммуноглобулины G Предполагаемая расшифровка
отрицательно отрицательно Организм никогда не сталкивался с данной инфекцией. Нет ни возбудителя, ни антител к нему.
отрицательно положительно Организм выработал стойкий иммунитет к инфекции.
положительно отрицательно Острая форма инфицирования.
положительно положительно Вероятнее всего первичное заражение, но требуются дополнительные диагностические исследования.

Анализируя представленную таблицу, можно сделать вывод, что в большинстве случаев для подтверждения диагноза потребуются дополнительные исследования. Не может дать однозначного ответа один лишь иммуноферментный анализ. Норма в данном случае не имеет четких границ: обнаруженные белки группы G указывают лишь на то, что организм ранее подвергался инфицированию определяемым возбудителем. Но этот же результат может говорить и о наличии острой фазы — важно сопоставить множество факторов и показателей для того, чтобы поставить правильный диагноз.

Факторы риска

ИФА является точным на 90%. Все же существуют факторы риска, которые влияют на искажение результата диагностики: неисправность аппаратуры, неправильный забор материала, его хранение и транспортировка, неучет иных внешних факторов.

Не рекомендуется проводить диагностику после переливания крови, гемолиза, хирургических вмешательств, взятия биопсии или пункции биологического материала — это также может повлиять на результаты показателей.

Стоимость анализа

Стоимость диагностического исследования имеет большой диапазон и зависит от вида анализа и определяемого антигена, так как исходя из этих факторов рассчитывается стоимость реагентных наборов и определяется сложность проведения анализа. Но в большинстве случае является доступным многим пациентам иммуноферментный анализ. Цена его составляет от 300 р. до 2000 р.

ИФА – доступный, быстрый и высокоэффективный метод диагностики большого перечня заболеваний. Но расшифровкой результатов и постановкой диагноза имеет право заниматься только квалифицированный медицинский работник.

www.syl.ru


Leave a Comment

Adblock
detector